一直以來，計算 in vitro transcribed 出的 RNA 或經由 DNA polymerase 做出的、isotope-labeled DNA 的 specific activity 是我的痛。我一直沒搞清楚為什麼可以由已知 isotope input specific activity (micro-Ci/nmole)、DNA template (nanogram)、和用幾張 filter paper 上點的 isotope 的量 (cpm)，計算得到 polymerase 所做出產物的 specific activity (dpm/microgram)。
今天 Lab Meeting 上被電之後，我到圖書館散心找資料，結果意外發現了一個好物，一條計算 specific activity 的公式：
Specific Activity 公式
出自 The condensed protocols from Molecular Cloning (Joseph Sambrook & David W. Russell, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2006) 一書。又是公式，沒錯。在我不應該沒有研究生樣地不想搞清楚 transcript 的 specific activity 到底怎麼得出來的時候，它還挺好用地。
Specific Activity 的單位是 (dpm/μg)。
公式中的其他項目是：
L：input radioactiv label (μCi)
PI：Washed/Unwashed value from DE81 filter paper
m：mass of template DNA (ng)
S：specific activity of input label (μCi/nmole)
而 DE81 filter paper (Whatman) 是要在 0.5M disodium hydrogen phosphate (pH 7.0) 中清洗。而我們 Lab 的 protocol 則是在 0.2M ammonium bicarbonate 中清洗。下次換成前者來洗好了，因為實驗室已經很少在用 DE81 法來計算 specific activity 了，而 protocol 則不曉得是誰抄自何處？
今天 Lab Meeting 上被電之後，我到圖書館散心找資料，結果意外發現了一個好物，一條計算 specific activity 的公式：
Specific Activity 公式
出自 The condensed protocols from Molecular Cloning (Joseph Sambrook & David W. Russell, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2006) 一書。又是公式，沒錯。在我不應該沒有研究生樣地不想搞清楚 transcript 的 specific activity 到底怎麼得出來的時候，它還挺好用地。
Specific Activity 的單位是 (dpm/μg)。
公式中的其他項目是：
L：input radioactiv label (μCi)
PI：Washed/Unwashed value from DE81 filter paper
m：mass of template DNA (ng)
S：specific activity of input label (μCi/nmole)
而 DE81 filter paper (Whatman) 是要在 0.5M disodium hydrogen phosphate (pH 7.0) 中清洗。而我們 Lab 的 protocol 則是在 0.2M ammonium bicarbonate 中清洗。下次換成前者來洗好了，因為實驗室已經很少在用 DE81 法來計算 specific activity 了，而 protocol 則不曉得是誰抄自何處？
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